- Products
- 遺伝子改変細胞株
- CRISPRmod CRISPRa dCas9-VPR発現細胞株
CRISPRmod CRISPRa dCas9-VPR発現細胞株
dCas9-VPRを安定的に発現させた細胞株で遺伝子転写活性化実験を効率的に
'CRISPR activation ready'細胞株
- ブラストサイジン耐性選択マーカー組み込みのHorizonのCRISPRa dCas9-VPRベクターにより製造しています。
- QC検証および妥当性確認をし、dCas9-VPRエンドヌクレアーゼの安定発現と機能が保証されています。
- プールフォーマット(クローニングをしておりません)
- >1 x 106 cells/vial
他のHorizon製品との併用に最適
個々の遺伝子転写活性化実験およびgain-of-function研究には、CRISPRa化学合成crRNA またはレンチウイルスgRNAを使用します。スクリーニングプロジェクトについては、組み合わせ済みの遺伝子ファミリー、druggable、または全ゲノムのCRISPRa synthetic crRNAスクリーニングライブラリーを選択するか、またはCherry-pickカスタムライブラリーツールを使用して独自のCRISPRaライブラリーを構築してください。
限定使用ラベルライセンス
Horizon Discoveryの細胞株をご購入の際は、細胞株の限定使用ラベルライセンス(LULL: LIMITED USE LABEL LICENSE AGREEMENT)へのご同意が必要です。
dCas9発現細胞株用細胞培養培地一覧
Cell line background | Cat # | Basal medium | Supplements | Subculturing tips |
---|---|---|---|---|
A549 | HD Cas9-001 | RPMI 1640 | 10% FBS 1% Pen/Strep |
|
HCT-116 | HD Cas9-002 HD dCas9-VPR-002 |
RPMI1640 | 10% FBS 1% Pen/Strep |
|
Jurkat | HD Cas9-004 | RPMI1640 | 10% FBS 1% Pen/Strep |
|
K-562 | HD Cas9-005 HD dCas9-VPR-005 |
IMDM | 10% FBS 1% Pen/Strep |
|
RKO | HD Cas9-007 | RPMI1640 | 10% FBS 1% Pen/Strep |
|
NIH/3T3 | HD Cas9-010 | DMEM, high glucose, GlutaMAXTM | 10% FBS 1% Pen/Strep |
|
HAP1 | HD Cas9-011 HD dCas9-VPR-011 |
IMDM | 10% FBS 1% Pen/Strep |
|
U2OS | HD Cas9-012 HD dCas9-VPR-012 |
DMEM, high glucose | 10% FBS 1% Sodium Pyruvate 1% Pen/Strep |
|
安定したdCas9発現細胞株にCRISPRa化学合成crRNA:tracrRNAを使用した効率的な遺伝子転写活性化
付着性のdCas9-VPR安定細胞株は10,000細胞/ウェルでプレーティングし、DharmaFECT 1またはDharmaFECT 4トランスフェクション試薬を使用して、ヒトTTN(カタログ番号:U-009100-01-XX)を標的とする化学合成crRNA:tracrRNA(25 nM)のプールフォーマットをリバーストランスフェクトしました。トランスフェクションの72時間後に細胞を回収し、RT-qPCRを使用して相対的な遺伝子発現を測定しました。相対的な転写活性化倍率は、ハウスキーピング遺伝子としてGAPDHを使用するCq法で計算され、non-targetingコントロール(カタログ番号:U-009500-01-XX)に対して正規化しました。
浮遊性のK562 dCas9-VPR安定細胞株の細胞懸濁液100,000細胞/ウェルは、ヒトTTNを標的とする化学合成crRNA:tracrRNA(25 nM)(カタログ番号:U-009100-01-XX)のプールフォーマットをLonzaバッファーSFを使用して、エレクトロポレーションしました。トランスフェクションの72時間後に細胞を回収し、RT-qPCRを使用して相対的な遺伝子発現を測定しました。相対的な転写活性化倍率は、ハウスキーピング遺伝子としてGAPDHを使用するCq法で計算され、non-targetingコントロール(カタログ番号:U-009500-01-XX)に対して正規化しました。