Horizon DiscoveryのCell Based Screening担当マネージャーであるJoanna Gawden-Boneが、CRISPR-Cas9技術を活用した機能ゲノミクススクリーニングが疾患や創薬のコンテキストにおける遺伝子機能の解明をいかにパワフルに後押しするかについて説明します。
このウェビナーでは、以下の点について説明します：
- さまざまなCRISPR-Cas9モダリティの使用に関する考慮事項
- プール化およびアレイ化CRISPR-Cas9スクリーニングの比較
- さまざまなリサーチクエスチョンに答えるためのCRISPR-Cas9スクリーニングのフォーマットについて
CRISPR-Cas9スクリーニングは、ホモ接合遺伝子ノックアウトが効率的に得られるためRNAiスクリーニングと比べて再現性が向上し、機能ゲノミクスのゴールドスタンダードになりました。CRISPR-Cas9システムはCas9のヌクレアーゼ不活性型（dCas9）の活用による内在性遺伝子の発現調節で、そのアプリケーションを拡張しました。
CRISPR interferenceスクリーニングでは、dCas9と融合したリプレッサーのリクルートにより遺伝子発現を抑制します。一方、CRISPR activationでは、CRISPR-dCas9が遺伝子活性化因子をsgRNAで指示された遺伝子座に特異的にターゲティングします。実際、これらの異なるアプローチを組み合わせたdualスクリーニングは、異なるCRISPR-Cas9スクリーニング技術による遺伝子の挙動を直接検証することになり、スクリーニング結果をさらに強化することができます。技術が進歩するにつれて、より複雑な生物学的クエスチョンに対処できるようその適用範囲が継続的に広がります。創薬パイプラインは、作用機序研究から患者層別化まで、CRISPR-Cas9スクリーニングから多くの情報が得られます。スクリーニング選択（プール化またはアレイ化）、およびCRISPR-Cas9テクノロジーの選択は、研究内容、試料（細胞株～オルガノイド）、およびご希望のリードアウトによって異なります。