CRISPRi（CRISPR interference）試薬

CRISPRi 化学合成ガイドRNAとコントロール

• CRISPRi  synthetic sgRNA（化学合成sgRNA）

  トランスフェクション後24時間以内に抑制される最も迅速なCRISPRiシステムです。化学合成RNAはヌクレアーゼ分解に対する耐性のために修飾されており、プールフォーマットまたは個別の試薬として利用できます。

  • CRISPRi synthetic sgRNAポジティブコントロール

    十分に特徴付けられた遺伝子を標的とする検証済みのsgRNAをポジティブコントロールして用いることで、実験条件の有効性を判断します。

  • CRISPRi synthetic sgRNA non-targetingコントロール

    遺伝子標的特異的sgRNAの非存在下でCRISPRiコンポーネントに対するベースラインの細胞応答を評価します。

CRISPRi lentiviralガイドRNAとコントロール

• CRISPRi lentiviral sgRNA

  トランスフェクションが困難な細胞、または長時間の抑制が必要な場合のCRISPRiの理想的なデリバリー方法です。

  • CRISPRi lentiviral sgRNA ポジティブコントロール

    十分に特徴付けられた遺伝子を標的とする検証済みのsgRNAをポジティブコントロールとして用いることで、実験条件の有効性を判断します。

  • CRISPRi lentiviral sgRNA non-targetingコントロール

    遺伝子標的特異的sgRNAの非存在下でCRISPRiコンポーネントに対するベースラインの細胞応答を評価します。

CRISPRi dCas9-SALL1-SDS3

独自の転写リプレッサードメイン（SALL1およびSDS3）に融合したヌクレアーゼ活性を不活性化したCas9

• CRISPRi dCas9-SALL1-SDS3 mRNA

  Dharmafect トランスフェクション試薬を使用して化学合成sgRNAとコトランスフェクトでき、レンチウイルスフリーのワークフローで一過性にdCas9-SALL1-SDS3を発現できます。

• CRISPRi dCas9-SALL1-SDS3 lentiviral particles

  ‘CRISPRi ready’ のdCas9-SALL1-SDS3安定発現細胞株を作製できます。

CRISPRi スクリーニングライブラリー

• カスタムcherry-pickライブラリー

  独自の遺伝子リストをアップロードし、数十～数千の遺伝子にわたるCRISPRi研究用デザイン済みsgRNAをプレートにカスタムレイアウトし、注文できます。

Horizon's CRISPRi ワークフロー

CRISPRi遺伝子転写抑制実験には複数のワークフローのオプションがあります。

• dCas9-SALL1-SDS3 lentiviral particlesで細胞を形質導入し、‘CRISPRi ready’のdCas9-SALL1-SDS3安定発現細胞を作製します。次に、標的遺伝子に対してデザインしたA）化学合成sgRNA、またはB）lentiviral sgRNA を導入して、ターゲット遺伝子をノックダウンします。このシステムは、スクリーニング、比較的長時間のアッセイ、またはトランスフェクションが困難な細胞タイプにおける実験に最適です。
• C) dCas9-SALL1-SDS3 mRNAを化学合成sgRNAとコトランスフェクトまたはエレクトロポレーションし、蛍光またはピューロマイシン耐性オプションを使用して細胞集団を濃縮します。 このシステムは、迅速で一過性の遺伝子抑制研究に最適です。

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CRISPRi ワークフロー