CRISPR遺伝子転写活性化(CRISPRa)により、研究者はDNAを編集することなく、転写を活性化することにより特定の遺伝子機能をアップレギュレートすることができます。
詳しくは、CRISPRa アプリケーションのページをご覧ください。
Horizon CRISPRmod CRISPRaシステムには、CRISPRaガイドRNAと転写活性化因子(VPR)に融合した触媒活性が不活性化されたCas9(dCas9)の2つのコンポーネントが必要です。当社のCRISPRa試薬は、ネイティブコンテキストでの過剰発現によって遺伝子の機能を研究するための簡便で効率的なツールです。
CRISPRa試薬の選択
CRISPRaの実験条件には多くのオプションと考慮事項があります。一般的には、dCas9-VPRが安定して発現する細胞集団を用いる場合に、最も強力な転写活性化を実現できます。
dCas9-VPRソース | ガイドRNAフォーマット | デリバリー方法 | メリットと推奨される使い方 |
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または CRISPRa dCas9-VPR lentiviral particle の形質導入とdCas9-VPR安定発現細胞の選択 |
CRISPRa synthetic crRNA(化学合成crRNA)+ tracrRNA | トランスフェクションまたはエレクトロポレーション |
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CRISPRa lentiviral sgRNA particles | 形質導入 |
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CRISPRa dCas9-VPR mRNA | CRISPRa synthetic crRNA(化学合成crRNA)+ tracrRNA | コトランスフェクションまたはエレクトロポレーション |
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CRISPRa dCas9-VPR lentiviral plasmid | CRISPRa lentiviral sgRNA plasmid | dCas9-VPRプラスミドとのコトランスフェクションまたはエレクトロポレーション |
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CRISPRa all-in-one dCas9-VPR + sgRNA | 形質導入 |
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Order CRISPRa guide RNA
CRISPRa lentiviral sgRNA
トランスフェクションが困難な細胞におけるCRISPR遺伝子転写活性化のための理想的なデリバリー方法
CRISPRa synthetic crRNA(化学合成crRNA)
tracrRNAとコトランスフェクトし、DNA-freeのCRISPR遺伝子転写活性化ワークフローを行います。
CRISPRa All-in-one Lentiviral sgRNA
dCas9-VPRとシングルガイドRNAを単一のベクターで発現させることにより、標的遺伝子の転写活性化のワークフローを簡略化します。
CRISPRa dCas9 solutions
dCas9-VPR安定発現細胞株
‘CRISPRa-ready’の細胞株。標的遺伝子に対するガイドRNA を導入するだけで転写活性化実験を行えます。
dCas9-VPR mRNA
抗生物質または蛍光マーカーによる濃縮のオプションも選択できます。
dCas9-VPR lentiviral試薬
lentiviral dCas9-VPRベクターは、関連する幅広い細胞タイプで強力な遺伝子転写活性化を実現します。
SAM転写活性化システム
MS2 tracrRNA
化学合成CRISPRa crRNAと、SAM転写活性化システムの両方のコンポーネント(NLS-dCas9-VP64およびMS2-p65-HSF1)を発現する安定した細胞株で使用します。
Helpful Resources
ビデオ:cDNA vs. CRISPRaをご覧ください。
過剰発現実験にはどちらが良いのでしょうか?選択のヒントをご紹介しています。
CRISPRa synthetic guide RNAとコントロール
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CRISPRa synthetic crRNA(化学合成sgRNA)
ヒトおよびマウスのゲノムをカバーするこれらの化学合成RNAは、ヌクレアーゼ分解に対する耐性のために修飾されており、プール化フォーマットまたは個別の試薬として利用できます。
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CRISPRa synthetic crRNAポジティブコントロール
遺伝子転写活性化の最適な実験条件の評価のためのプールフォーマットまたは個別のcrRNAコントロール
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CRISPRa synthetic crRNA non-targetingコントロール
遺伝子標的特異的sgRNAの非存在下でCRISPRiコンポーネントに対するベースラインの細胞応答を評価します。
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Synthetic tracrRNA
Trans-activating CRISPR RNA (tracrRNA)は、HPLCで精製された化学合成の長鎖RNAであり、dCas9-VPRをプログラムする複合体を形成するためにcrRNAとともに使用します。ヌクレアーゼ分解に対する耐性のために修飾されています。
CRISPRa lentiviral guide RNAとコントロール
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CRISPRa lentiviral sgRNA
ベクタータイプのシングルガイドRNAのレンチウイルス粒子またはグリセロールストックは、ヒトおよびマウスの遺伝子をゲノムワイドにカバーし、デザイン済みをご用意しています。
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CRISPRa lentiviral sgRNAポジティブコントロール
遺伝子転写活性化の最適な実験条件の評価のためのsgRNAコントロール
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CRISPRa lentiviral sgRNA non-targetingコントロール
遺伝子標的特異的crRNAの非存在下でCRISPRaコンポーネントに対するベースラインの細胞応答を評価します。
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CRISPRa dCas9-VPR試薬
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dCas9-VPR安定発現細胞株
汎用されるさまざまなバックグラウンドの‘CRISPRa ready’細胞株。標的遺伝子のガイドRNA を導入するだけで遺伝子転写活性化実験を行えます。
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dCas9-VPR mRNA
CRISPRa化学合成ガイドRNAとコトランスフェクトし、レンチウイルスフリーのワークフローを実現します。
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dCas9-VPR lentiviral particles
dCas9-VPR安定発現細胞株を作製するために使用します。
CRISPRaスクリーニングライブラリー
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カスタムcherry-pickライブラリー
独自の遺伝子リストをアップロードし、数十~数千の遺伝子のCRISPRa研究用デザイン済みcrRNAをプレートにカスタムレイアウトし、注文できます。
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CRISPRa化学合成crRNAライブラリー
遺伝子ファミリー、創薬用、および全ヒトゲノムの過剰発現スクリーニング実験のための化学合成CRISPR RNA(プレートフォーマット)のコレクション
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CRISPRa All-in-one sgRNA ライブラリー
プール化CRISPRa all-in-oneレンチウイルスヒト全ゲノムライブラリー
CRISPRa ワークフロー
CRISPRa遺伝子転写活性化実験には複数のワークフローのオプションがあります。同時トランスフェクションを行う場合でも、安定したdCas9-VPR細胞株を作製する場合でも(推奨)、化学合成RNA、レンチウイルス粒子、またはグリセロールストック(プラスミド)sgRNAから選択し、dCas9-VPRプラスミドまたはレンチウイルス粒子と組み合わせることができます。
dCas9-VPR安定発現細胞を作製して使用するCRISPRa | CRISPRaプラスミドのコトランスフェクション |