TRIPZ Lentiviral shRNAは、Dr. Greg Hannon（CSHL）およびDr. Steve Elledge（Harvard）と共同で開発されました。このライブラリーは、microRNAに適応したshRNAの設計上の利点とTRIPZレンチウイルス誘導ベクターを組み合わせて、ほとんどの細胞タイプで遺伝子サイレンシングできる強力なRNAiトリガーを作成します。このベクターはTet-On®になるように設計されており、ドキシサイクリンの存在下で厳密に制御されたshRNA発現を誘導します。

Highlights:

• Tet誘導性shRNA発現により、可逆的かつ調節可能な遺伝子ノックダウンが可能
• microRNAに適応したshRNA設計は、サイレンシングの特異性と効力を高めます。
• TurboRFP蛍光レポーターにより、shRNA発現の視覚的追跡が可
• Tet-On^®およびTet-Off^®構成が可能
• レンチウイルスベクターは、初代細胞および非分裂細胞への形質導入を可能にします。

TRIPZ Inducible Lentiviral shRNAライブラリーは、8%グリセロール、カルベニシリン（100μg/mL）、およびゼオシン（25μg/mL）を含む低塩（low salt: LB）ブロス中の大腸菌の凍結保存培養物を含む96ウェルマイクロタイタープレートで提供されます。shRNAライブラリーは、ドライアイスで冷凍して出荷されます。出荷前にすべての培養物の成長をチェックします。

Tet-OnまたはTet-Off構成

事前に設計されたTRIPZshRNAコレクションは、ドキシサイクリンの存在下でのshRNAの発現用に構成されています（Tet-On構成）。ただし、ドキシサイクリンの非存在下で発現が起こるように構築物を変更することは可能です(Tet-Off構成)。pTRIPZベクターは、Cre-loxP部位特異的組換えまたは標準的な制限消化により、Tet-Off構成に簡単に変換できます。rtTA3は、Creリコンビナーゼへの曝露によるrtTA3のin vitroまたはin vivo切除を可能にするloxP部位に隣接しています。rtTA3には、1対のBamHI制限部位が隣接しているため、ベクターを簡単に切断およびライゲーションしてrtTA3を除去できます。rtTA3が存在しない場合、テトラサイクリントランスアクチベーター（tTA）をシステムに外部から追加して、Tet-Off®として機能させることができます。ここで、ドキシサイクリンの非存在下で、shRNAとTurboRFPの発現が交互に誘導されます。

GIPZ Lentiviral shRNAおよびTRIPZ Inducible Lentiviral shRNAは、InvitrogenのViraPowerなどの第3世代パッケージングシステムと適合性がないことに注意してください。GIPZおよびTRIPZ shRNAの形質導入用のレンチウイルス粒子を生成するには、Trans-Lentiviral Packaging Systemをお勧めします。