Edit-R HDRプラスミドドナーキット
EGFP、mKate2、またはカスタム配列を持つHDRノックインプラスミドDNAドナーの組み立て用キット
キットには、CRISPR-Cas9とHDR経路を使用して、EGFPまたはmKate2蛍光レポーター、または任意のゲノム位置にカスタムインサート配列を導入するためのカスタムプラスミドDNAドナーを構築するために必要なコンポーネントが含まれています。
CRISPR-Cas9を使用した遺伝子工学では、切断された標的DNAの修復に、非相同末端結合（non-homologous end joining: NHEJ）または相同組換え修復（homology-directed repair: HDR）の2つのいずれかの経路を用います。特定の変異を生じさせたり、目的の配列を挿入または削除したりするためのDNAの正確な修復には、HDR経路が必要です。このプロセスは、DNAの二本鎖切断修復に使用できるDNAドナーテンプレートが利用できるかどうかに依存します。最も一般的なアプリケーションの1つは、遺伝子の一端への蛍光レポーター配列の挿入です。Edit-R HDRプラスミドドナーキットを使用すると、EGPFまたはmKate2蛍光レポーターまたはユーザー独自のカスタム配列をほぼすべてのゲノム位置に挿入するためのプラスミドドナーを迅速かつ簡単に作製できます。
Highlights
- DNAドナープラスミドを迅速かつ効率的に組み立てます。
- ドナープラスミドの設計、組み立て、確認のための検証済みプロトコールをご用意しています。
- CRISPR Design Tool を利用して、切断部位へのcrRNAを設計できます。
- 挿入部位を挟む5'および3'相同性アームを作成するためのプライマー設計用のHDR Donor Designerとシームレスに統合されています。
HDRプラスミドドナーキットには、カスタムDNAドナーテンプレートプラスミドを構築および品質チェックするためのすべてのDNAコンポーネントが含まれており、Edit-R HDR DNAドナープラスミドホモロジーアーム・カスタムプライマーペアと組み合わせると、ほぼすべてのゲノム位置に蛍光レポーターを挿入できます。
HDR Donor Designerは、プラスミドの組み立てに必要な5'および3'相同性アームの増幅用PCRプライマーを設計および注文するために使用されます。
キット構成と容量
| Cat # | Description | Item# | Amount |
|---|---|---|---|
| UK-008100-01-10 | Edit-R HDR Plasmid Donor Kit - EGFP | ||
| Edit-R HDR Plasmid Donor Backbone | U-008300-01-1200 | 1200 ng | |
| Edit-R HDR insert - EGFP | U-008100-01-250 | 250 ng | |
| Edit-R Colony PCR Primer EGFP Forward | U-008100-FB-05 | 5 nmol | |
| Edit-R Colony PCR Primer EGFP Reverse | U-008100-RA-05 | 5 nmol | |
| Edit-R Colony PCR Primer Backbone Forward | U-008300-FW-05 | 5 nmol | |
| Edit-R Colony PCR Primer Backbone Reverse | U-008300-RV-05 | 5 nmol | |
| UK-008200-03-10 | Edit-R HDR Plasmid Donor Kit -mKate2 | ||
| Edit-R HDR Plasmid Donor Backbone | U-008300-01-1200 | 1200 ng | |
| Edit-R HDR insert - mKate2 | U-008200-01-250 | 250 ng | |
| Edit-R Colony PCR Primer mKate2 Forward B | U-008200-FB-05 | 5 nmol | |
| Edit-R Colony PCR Primer mKate2 Reverse A | U-008200-RA-05 | 5 nmol | |
| Edit-R Colony PCR Primer Backbone Forward | U-008300-FW-05 | 5 nmol | |
| Edit-R Colony PCR Primer Backbone Reverse | U-008300-RV-05 | 5 nmol | |
| UK-008300-01-10 | Edit-R HDR Plasmid Donor Kit - Universal | ||
| Edit-R HDR Plasmid Donor Backbone | U-008300-01-1200 | 1200 ng | |
| Edit-R Colony PCR Primer Backbone Forward | U-008300-FW-05 | 5 nmol | |
| Edit-R Colony PCR Primer Backbone Reverse | U-008300-RV-05 | 5 nmol |
