CRISPRmod CRISPRa all-in-one lentiviral sgRNA 全ゲノムプール化ライブラリー

CRISPRa all-in-oneプール化レンチウイルスライブラリーを1回導入するだけで、数千の遺伝子を転写レベルで過剰発現させることができます。

本ライブラリーフォーマットは、遺伝子導入が困難な細胞や初代細胞での遺伝子活性化に有効であり、効率的なゲノムスクリーニングを可能にすることで、遺伝子研究や治療法の発見を促進します。

プロモーター（mCMVおよびhEF1α）の選択により、目的の細胞における最適なdCas9-VPR発現が可能になります。

CCRISPRmod CRISPRaシステムは、CRISPRa sgRNAと転写活性化因子（VPR）が融合した切断活性が不活化されたCas9（dCas9）の2つのコンポーネントが必要です。当社のCRISPRa all-in-one ライブラリーは、ネイティブコンテキストでの過剰発現によって遺伝子の機能を研究するための簡便で効率的なツールです。

CRISPRmod CRISPRa ガイドRNAデザインは、公開されているCRISPRa v2アルゴリズム（Horlbeck et al 2016）を使用して設計されています。CRISPRa ガイドRNAは、標的遺伝子のプロモーター領域または転写開始部位（TSS: transcriptional start site）の上流の遺伝子配列を標的とし、転写活性化を促進します。

CRISPRmod CRISPRa all-in-one lentiviralベクターマップ
Schematic map of the CRISPRmod CRISPRa All-in-one lentiviral vector
Highlights:
  • dCas9-VPRおよび遺伝子特異的sgRNA発現の両方に単一のレンチウイルスベクターを使用する効率的な all-in-oneベクターシステム
  • 効率的かつ特異的な遺伝子活性化をもたらす合理的に設計されたレンチウイルスsgRNA
  • ヒトゲノム全体にわたり、1遺伝子あたり4または8個のsgRNAで深く広いカバレッジを実現し、ヒットの信頼性を向上
  • 生物学的に関連性のある細胞タイプでロバストな活性化を行うための複数のプロモーターオプション
  • 最小限の細胞毒性で直接導入するために濃縮、精製された高品質の ≥ 2 × 107 TU/mL（± 20%）レンチウイルス粒子
各CRISPRmod CRISPRa all-in-one lentiviral pooled screening libraryには、次のものが含まれています：
  • ≥ 2 × 107 TU/mL（± 20%）レンチウイルス粒子、10 × 100 uL アリコート、mCMVまたはhEF1αプロモーターオプション付き
  • ヒトゲノムのどの遺伝子ともアライメントしない（標的化しない）ことがバイオインフォマティックに確認された最大100個のnon-targeting gRNA ネガティブコントロール
  • 遺伝子アノテーション、sgRNAターゲット配列、完全なコントロールリスト、数百万マップリードあたりのカウントを含む完全なライブラリー情報を含むデータファイル
当社の検証済みプロトコールで推奨されている製品：
  • トランスダクションの最適化とプロモーター選択のためのベクター対応CRISPRa EGFPデリバリーコントロール
  • NGS Hit Identification primers （mCMVまたはhEF1α ベクター用）：
    • バイアスを最小限に抑えたゲノムDNAの効率的なPCR増幅
    • NGSランに多様性をもたらすスタッガードフォワードプライマー
    • 部分的なIllumina®互換TruSeq®アダプターの追加 
Edit-R Lentiviral sgRNA プール化ライブラリーのカバレッジに関する情報

遺伝子数およびコンストラクト数は予告なく変更される場合があります。クローン数および遺伝子数はご要望に応じてご提供いたします。Scientific Supporへお問い合わせください。