CRISPRa dCas9-VPRレンチウイルス粒子は、3つの転写活性化因子（VP64、p65、およびRta）と2つの核局在化シグナル（NLS）に融合した、ヒト用にコドンを至適化したヌクレアーゼ不活性化Cas9遺伝子を発現します。プロモーター領域または転写開始部位（TSS: transcriptional start site）の上流の遺伝子配列を標的とする適切に設計されたガイドRNAと組み合わせると、遺伝子のネイティブ転写開始部位（TSS: transcriptional start site）が活性化されます。

テクノロジーの概要は、CRISPRaアプリケーションのページをご確認ください。

ハイライト

• 独自のCRISPRa readyのdCas9-VPR安定発現細胞株を作製します。
• 即時形質導入用の濃縮精製レンチウイルス粒子です（qPCR力価測定により、1x10⁷ TU/mL以上の機能力価）。
• パッケージング細胞株への直接トランスフェクション、および独自のレンチウイルス粒子の生産のために、認定されたエンドトキシンフリーのプラスミドDNAとしても利用可能です。
• ブラストサイジン耐性遺伝子は、細胞集団の選択、または各細胞からのクローン化を可能にします。

• 目的の細胞での最適な発現のために、3種類のプロモーターから選択できます（以下のオプションを参照）。

dCas9-VPRレンチウイルス粒子を使用したCRISPRa実験の要件

• CRISPRa dCas9-VPR lentiviral particle
• 標的遺伝子のCRISPRa lentiviral sgRNA（ワークフロータブを参照）

すべてのRNA pol IIプロモーターが異なる細胞環境で等しく活性であるわけではない

dCas9-VPRの転写を制御する任意のプロモーターの活性は、生物学的状況によって大きく異なる可能性があり、その結果、dCas9-VPRの発現レベルが変動し、ひいては遺伝子転写活性化のレベルが変動します。細胞株に最適なプロモーターを選択することは、強力な遺伝子過剰発現にとって重要です。