CRISPRmod CRISPRi lentiviral sgRNA
ヒト遺伝子の効率的な転写抑制のためのデザイン済みCRISPRiレンチウイルスsgRNA
- トランスフェクションが困難な細胞、または長期間の転写抑制が必要な実験のためのCRISPRiの理想的なデリバリー方法
- 高力価レンチウイルス粒子またはグリセロールストックとして利用可能
CRISPRi lentiviral sgRNA
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CRISPRiによる効率的な内在性遺伝子転写抑制
CRISPR interference（CRISPRi）は、CRISPR-Cas9遺伝子編集システムを改変したものです。HorizonのCRISPRmod CRISPRiシステムは、独自の転写リプレッサー（SALL1およびSDS3）に融合された触媒活性が不活化されたCas9（dCas9）を利用します。転写開始部位（TSS）のすぐ下流の遺伝子を標的とするアルゴリズム設計のガイドRNAと組み合わせると転写抑制が促進されます。
テクノロジーの概要はCRISPRiアプリケーションのページをご確認ください。
CRISPRi lentiviral sgRNA試薬のハイライト
- グリセロールストックまたは高力価精製レンチウイルス粒子として利用可能です。
- Horlbeckら（2016）によって公開されたアルゴリズムを使用して設計されています。最適化された設計が強力なレベルの遺伝子転写抑制を実現しています。
- 精製／濃縮された高力価レンチウイルス粒子は、トランスフェクションが困難な細胞に直接形質導入することができます。
lentiviral sgRNAを使用したCRISPRi実験に必要な試薬
- ターゲット遺伝子のCRISPRi lentiviral sgRNA
- CRISPRi dCas9-SALL1-SDS3 lentiviral particles（ワークフローを参照）
CRISPRi lentiviral sgRNAベクターマップ
CRISPRi lentiviral sgRNAベクターバックボーンでは、遺伝子特異的ガイドRNAはヒトU6プロモーターの制御下で発現します。ピューロマイシン耐性遺伝子（PuroR）の発現はマウスCMVプロモーターから駆動され、sgRNAが組み込まれた細胞の迅速な選択を可能にします。プラスミドには、大腸菌での増殖と選択のためのAmpR耐性マーカーが含まれています。
