Cas9 nuclease protein NLS
Cas9ヌクレアーゼ発現のためのDNA-freeオプション
精製済みCas9 nuclease protein NLSは、化学合成ガイドRNAとのコトランスフェクションで使用することにより、完全にDNA-freeのゲノム編集実験を行うことができます。
大容量製品の価格についてはお問い合わせください。
*Note: 濃度とサイズが変更となりました。Descriptionの表をご確認ください。
CRISPR-Cas9システムにおけるCas9ヌクレアーゼ
CRISPR関連酵素Cas9は、ゲノムDNAの標的認識とDNA二重鎖切断(double-strand breaks: DSB)のためにガイドRNAを必要とするRNA-guidedエンドヌクレアーゼです。
精製されたCas9 nuclease NLS proteinは、ready-to-useであり、完全なDNA-freeの方法でゲノムエンジニアリング実験を行うことができます。
Cas9 protein highlights
- 化学合成ガイドRNAとともに、簡単にコトランスフェクションまたはコエレクトロポレーションができます。
- 外来DNAを使わない実験系であるため、プラスミドDNAを宿主細胞のゲノムに組み込む可能性がありません。
- プロモーターと細胞株の間の非適合性を考慮する必要がありません。
- Cas9ヌクレアーゼの一過的な発現により、オフターゲットを低減します。
Edit-R™ ゲノム編集試薬では、DharmaFECTトランスフェクション試薬を使用することを強く推奨しています。DharmaFECT Cell Type Guideをご参照の上、細胞タイプに適したDharmaFECTトランスフェクション試薬をご選択ください。
Cas9 nuclease protein NLS試薬の量と濃度
Catalog # | Concentration | Volume | Quantity | ||
---|---|---|---|---|---|
µM | µg/µl | µl | µg | pMol | |
CAS12205 | 61.8 | 10 | 10 | 100 | 618 |
CAS12206 | 61.8 | 10 | 50 | 500 | 3090 |
CAS12207 | 61.8 | 10 | 5 x 50 | 5 x 500 | 5 x 3090 |
CAS11728 (discontinued) | 20 | 3.2 | 12.5 | 40 | 250 |
CAS11200 (discontinued) | 20 | 3.2 | 25 | 80 | 500 |
CAS11201 (discontinued) | 20 | 3.2 | 50 | 160 | 1000 |
CAS11729 (discontinued) | 40 | 6.4 | 12.5 | 80 | 500 |
CAS11730 (discontinued) | 40 | 6.4 | 25 | 160 | 2 x 500 |
Cas9ヌクレアーゼタンパク質とEdit-R 化学合成ガイドRNAを使用した遺伝子ノックアウト・ワークフロー
Cas9 Nuclease protein NLSおよびガイドRNAによるゲノム編集は、すべてのコンポーネントをDharmaFECT Duoトランスフェクション試薬(または目的の特定の細胞に適した他のDharmaFECTトランスフェクション試薬)を用いてコトランスフェクションすることにより行います。その後、表現型を直接観察することができます。DNAミスマッチ検出アッセイは、クローン細胞株の作製と特性評価の前に、ゲノム編集効率を推定するために使用することができます。
Cas9 nuclease protein NLSデータ
RNPとしてエレクトロポレーションされた化学合成ガイドRNAとCas9 nuclease protein
ガイドRNAとCas9タンパク質を組み合わせてRNP複合体を形成し、CD3/CD28刺激CD4+初代ヒトT細胞にヌクレオフェクトしました。表現型の機能的ノックアウトは、ヌクレオフェクションの72時間後に標的遺伝子発現のFACS分析によって測定されました。
Cas9 nuclease proteinと共導入した化学合成ガイドRNA
U2OS細胞を96ウェルプレートに10,000 細胞/ウェルで播種し、化学合成ガイドRNAおよびCas9 nuclease protein NLSを、DharmaFECT 1トランスフェクション試薬(0.1 μL/ウェル)を使用してコトランスフェクトしました。ゲノム編集は、T7E1ミスマッチ修復アッセイによって評価しました。
NTC1= Non-TargetingコントロールsgRNA