CRISPRmod CRISPRa crRNA non-targetingコントロール
標的遺伝子特異的crRNAの非存在下でCRISPRaコンポーネントに対するベースライン細胞応答を評価するためのnon-targetingコントロール
CRISPRa crRNA non-targetingコントロールは、CRISPRa crRNAプールフォーマットまたは個別でご用意しており、遺伝子転写活性化実験のネガティブコントロールとして使用するために設計され、推奨されています。これらのnon-targetingコントロールは、tracrRNAとハイブリダイズし、dCas9-VPR複合体と会合しますが、ヒトまたはマウスゲノム内のPAM隣接部位を標的としません。ネガティブコントロールで処理された細胞で観察された遺伝子発現レベルまたは生存率の変化は、ターゲット固有のCRISPRa crRNAのプールフォーマットまたは個別crRNAで処理された細胞と比較するための、dCas9-VPR複合体に対する細胞のベースライン応答として使用できます。
Highlights
- ヒトまたはマウスのゲノム内の潜在的なターゲット配列に対して少なくとも3つのミスマッチまたはギャップを検証するために使用される独自のアラインメントツールを採用
- 実験に使用するcrRNA試薬フォーマットに一致するフォーマットまたは個別crRNAコントロールを選択できます。
注意：CRISPRa化学合成crRNA試薬は、tracrRNAと組み合わせて用います。
| crRNA nmol | tracrRNA nmol | 96-well plate 100 µL volume | 24-well plate 500 µL volume | 12-well plate 1000 µL volume | 6-well plate 2500 µL volume |
|---|---|---|---|---|---|
| 2 | 2 | 800 | 160 | 80 | 32 |
| 5 | 5 | 2000 | 400 | 200 | 80 |
| 10 | 10 | 4000 | 800 | 400 | 160 |
| 20 | 20 | 8000 | 1600 | 800 | 300 |
