- CRISPRi (CRISPR interference) 試薬
- CRISPRi all-in-one Lentiviral sgRNA
CRISPRmod CRISPRi all-in-one Lentiviral sgRNA
簡便なデリバリーおよび効率的な遺伝子抑制のためのヒト用のdCas9-SALL1-SDS3とsgRNAの単一発現ベクター
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CRISPRmod CRISPR interference (CRISPRi)システムで、目的の遺伝子の転写を抑制した安定な細胞株を容易に作製することができます。このシステムは古典的なCRISPR-Cas9遺伝子編集システムのユニークな応用であり、触媒機能が不活性化されたCas9(deactivated Cas9: dCas9)をリプレッサードメイン(SALL1およびSDS3)と融合して利用します。プロモーター領域または転写開始部位(transcriptional start site: TSS)付近の配列を標的として設計されたガイドRNAと組み合わせると、転写を抑制することができます。
ピューロマイシン耐性遺伝子またはEGFPマーカーを選択することで、ベクターの統合に成功した細胞を選択することができます。EGFP選択マーカーは、蛍光が発現するとすぐにFACS分析が行えるので、編集細胞すぐに濃縮したい場合にご利用いただけます。これは、初代細胞のような寿命の短い細胞タイプに特に適しています。
デザイン済みのall-in-one CRISPRi Lentiviral sgRNAの特長:
- 最低限の細胞毒性で直接導入するための高品質、濃縮、精製されたレンチウイルス粒子(力価:1 x 107 TU/mL以上)
- Horlbeckらによる報告されたアルゴリズムにより最適化されたデザインは、強力な遺伝子抑制レベルを示します(Referencesタブを参照)。
- 異なる転写開始部位 を持つ遺伝子の場合は、異なるガイドRNAデザインも利用可能(P2と表示)
技術概要は、CCRISPRiアプリケーションのページ、またはall-in-one CRISPRアプリケーションのページご覧ください。
CRISPRi all-in-one Lentiviral sgRNAコントロール
CRISPRi all-in-one lentiviral sgRNAポジティブコントロール
- 十分に特徴付けられた遺伝子を標的とするAll-in-one Lentiviral sgRNAであり、遺伝子転写抑制の効率を最大化するための実験条件の検討、および最適化の確認のために使用します。
CRISPRi all-in-one lentiviral sgRNA non-targetingコントロール
- バイオインフォマティクスに基づき設計されたall-in-one non-targeting sgRNAコントロールは、標的遺伝子特異的sgRNAの非存在下でCRISPRiコンポーネントに対するベースラインの細胞応答を評価するために使用します。
- M. A. Horlbeck et al., Compact and highly active next-generation libraries for CRISPR-mediated gene repression and activation. eLife. 5, e19760 (2016).
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Related Products
all-in-one non-targetingコンストラクトは、バイオインフォマティクスに基づいて設計され、ヒトやマウスのゲノムのどの遺伝子も標的としないことが検証されています。
RISPRmod CRISPRi all-in-one lentiviral sgRNAポジティブコントロールは、目的の細胞タイプにおけるCRISPR遺伝子転写抑制の効率を最大化するための実験条件の検討、および最適化の確認のために使用します。